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小鼠酪蛋白β(β-CN)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/1/9瀏覽:64次

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  小鼠酪蛋白β(β-CN)ELISA試劑盒實驗使用說明書主要包括以下關(guān)鍵步驟和注意事項?:

  ?實驗準備?

  試劑盒應(yīng)保存在2-8℃條件下,使用前需室溫平衡20分鐘?。

  準備必要的實驗器材,如酶標儀(450nm)、高精度加樣器及槍頭、37℃恒溫箱等?。

  ?樣本收集與處理?

  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管收集血液,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘分離血清和紅細胞?。

  血漿:采用EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清?。

  細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物?。

  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清?。

  若樣本不及時檢測,應(yīng)按一次用量分裝并凍存于-20℃?。

  ?實驗步驟?

  ?加樣?:在酶標包被板上設(shè)定標準品孔、待測樣品孔和空白孔。標準品設(shè)定5個濃度點,每個濃度設(shè)定平行孔,加入50微升不同濃度的標準品;待測樣品孔先加樣品稀釋液40微升,再加待測樣品10微升(最終稀釋度為5倍);空白孔加入50微升蒸餾水?。

  ?溫育?:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘?。

  ?配液?:將濃縮洗滌液按倍數(shù)稀釋后備用?。

  ?洗滌?:揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)5次,拍干?。

  ?加酶?:每孔(除空白孔外)加入酶標試劑50微升?。

  ?再次溫育?:操作同溫育步驟?。

  ?再次洗滌?:操作同洗滌步驟?。

  ?顯色?:每孔先加入顯色劑A50微升,再加入顯色劑B50微升,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘?。

  ?終止?:每孔加終止液50微升,終止反應(yīng)(顏色由藍轉(zhuǎn)黃)?。

  ?測定?:以空白孔調(diào)零,在450nm波長下依序測量各孔的吸光度(OD值),測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行?。

  ?注意事項?

  試劑盒僅用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷?。

  實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封并低溫干燥保存?。

  標準品稀釋液和濃縮洗滌液在使用前應(yīng)確保溶解,避免結(jié)晶影響實驗結(jié)果?。

  實驗過程中需嚴格遵守操作規(guī)程,確保實驗結(jié)果的準確性。

  請根據(jù)實際使用的試劑盒品牌和說明書進行具體操作,如有差異請遵循產(chǎn)品說明書。


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